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純水色譜柱,耐受原理知一二

更新時(shí)間:2020-01-17 點(diǎn)擊次數(shù):7151

 

 

哈哈,看到月旭的色譜柱給老師們解決了實(shí)驗(yàn)問(wèn)題,小編心里真是很樂(lè)滋滋呢~月旭的AQ色譜柱也是可以耐受100%純水相的色譜柱,對(duì)強(qiáng)極性化合物的保留的確很不錯(cuò)的。那么對(duì)于常見(jiàn)的反相C18色譜柱,能夠耐受100%水相的還有哪些呢?耐受的原理又是如何呢?今天就跟小編一起來(lái)了解一下吧~

 

疏水基團(tuán)低鍵合密度

 

我們都知道,反相C18色譜柱在保留時(shí),水相比例一般不宜大于90%,而極性化合物在C18柱上的保留行為較弱,有時(shí)甚至有機(jī)相比例降至5%也沒(méi)有很好的保留,但過(guò)高比例的水相易使C18鏈發(fā)生蜷縮,得不到充分的潤(rùn)濕和舒展,大大降低C18色譜柱的保留能力。像上面對(duì)話中老師用到的月旭Ultimate® AQ-C18色譜柱,就是通過(guò)降低疏水基團(tuán)(即C18)的鍵合密度,da程度降低C18鏈的坍縮,從而大限度地增加極性化合物的保留。月旭Ultimate® AQ -C18色譜柱在高含水量的流動(dòng)相中,對(duì)有機(jī)酸、核苷等水溶性強(qiáng)極性化合物具有較好的保留能力。

 

圖1 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離6種有機(jī)酸

 

圖2 Ultimate® AQ-C18色譜柱分離5種核苷酸

 

側(cè)鏈基團(tuán)位阻

 

普通C18鏈對(duì)于水相的不耐受還體現(xiàn)在高比例水相或鹽相下,鍵合相易受到水分子或鹽分子的作用從而造成鍵合相水解脫落。對(duì)于這一作用,月旭科技的Ultimate® LP-C18則完美的解決了該問(wèn)題。通過(guò)在C18烷基側(cè)鏈引入較大的官能團(tuán),其空間立體效應(yīng)阻礙了流動(dòng)相分子對(duì)鍵合相硅氧鍵的作用。同時(shí),由于Ultimate® LP-C18的未封尾特性,使得該系列色譜柱在酸性條件下(pH可低至0.5)依舊擁有*的耐受能力。

 

圖3 月旭Ultimate® LP系列色譜柱鍵合相示意圖

 

封尾工藝

 

常見(jiàn)的C18色譜柱都是使用*基氯硅烷封尾試劑來(lái)對(duì)色譜柱進(jìn)行封尾,而如果使用含有極性官能團(tuán),或含有親水端基的封尾試劑進(jìn)行封尾,就能夠很好地改善與100%水相的兼容性,同時(shí),由于加入了極性親水基團(tuán),取代了大量的硅醇基位點(diǎn),在分析堿性化合物的時(shí)候能有效防止堿性化合物與硅醇基的相互作用,改善峰形。月旭Ultimate®ODS-3色譜柱,月旭Ultimate® ALK-C18色譜柱等,就是采用的該鍵合工藝。

 

圖4 極性親水基團(tuán)試劑封尾工藝

 

極性基團(tuán)嵌入

 

給色譜柱鍵合相嵌入極性基團(tuán)的作用原理類(lèi)似于極性基團(tuán)封尾,區(qū)別是極性基團(tuán)加入的位置是嵌入到C18鏈中。極性嵌入基團(tuán)有利于增加水分子在烷基鏈表面的濃度,提高對(duì)極性化合物的保留,及水相的耐受,例如月旭Ultimate® Polar-RP色譜柱。

 

圖5 極性嵌入基團(tuán)C18柱

 

極性官能團(tuán)的嵌入,也可以通過(guò)氫鍵作用,將硅羥基或解離的硅氧負(fù)離子屏蔽起來(lái)(見(jiàn)下圖),進(jìn)而保證堿性化合物的峰形。

圖6 月旭Ultimate® Polar-RP內(nèi)嵌極性官能團(tuán)對(duì)硅氧負(fù)離子的屏蔽作用

 

這樣看來(lái),分析極性親水化合物的時(shí)候,可耐受純水的色譜柱真是優(yōu)勢(shì)明顯呢,難怪老師們對(duì)月旭的色譜柱贊美有加了。耐受純水的色譜柱由于上述種種工藝的不同,有時(shí)在方法開(kāi)發(fā)的時(shí)候還能提供不一樣的保留特性,使得許多分離復(fù)雜極性樣品的問(wèn)題迎刃而解。

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