c18固相萃取小柱的萃取過程和操作步驟
更新時間:2020-07-27 點擊次數(shù):9699
c18固相萃取小柱是一個包括液相和固相物理萃取過程。在固相萃取過程中,固相對分析物的吸附力大于樣品基液。當(dāng)樣品通過SPE柱時,分析物被吸附在固體填料表面,其它樣品組分基液通過柱子。用適當(dāng)溶劑將樣品洗脫下來,從而起到對樣品的分離、純化或濃縮作用。
操作步驟:
1)柱預(yù)處理(活化):預(yù)處理由兩個目的“一是去除填料中可能存在的雜質(zhì),二是對填料溶劑化,展開碳?xì)滏溤黾雍头治鑫镒饔玫谋砻娣e。填料溶劑化,提高結(jié)果的重現(xiàn)性對于反相填料來說,預(yù)平衡是必須的,即先用強(qiáng)溶劑潤濕固定相,然后用弱溶劑加以平衡。
2)上樣:把處理好的樣品上柱,用正壓或負(fù)壓使樣品通過柱子。樣品的流速必需控制,對于生物樣品,一般在1.5ml/min。對于以離子交換為作用機(jī)理的萃取,樣品通過SPE柱的速度應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档?,以保證分析物有足夠的時間與SPE柱填料的離子交換功能團(tuán)發(fā)生作用。
3)淋洗:選擇合適溶劑,去除干擾雜質(zhì),使目標(biāo)分析物得以保留。
4)洗脫:選擇合適強(qiáng)度的溶劑洗脫目標(biāo)分析物。
c18固相萃取小柱適用于可解離成帶電離子的化合物,其機(jī)理是利用帶電荷的目標(biāo)化合物離子與帶相反電荷的吸附劑之間的靜電吸引力。樣品基質(zhì)可以是極性的,如水溶液,也可以是非極性的有機(jī)溶液,但在實際應(yīng)用中以水溶液較多,包括生物體液、江河湖海等自然水、廢水等。