親和層析之蛋白A
更新時間:2021-08-25 點擊次數(shù):967
球菌的細胞壁,與IgG的Fc片段具有非常強的特異性,分子量約為42×103,如圖所示。一般在蛋白 A親和層析中,配基在中性pH條件下結合抗體,在酸性pH條件下與蛋白解離。
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蛋白A與抗體IgG的Fc片段結合模式
基于蛋白 A 親和層析的抗體捕獲工藝較為穩(wěn)定,但也存在一些不足,主要包括:
(1)介質成本高。
(2)配基易脫落。
(3)洗脫條件苛刻。
(4)Protein A介質的再生比較困難。
針對以上問題,部分商業(yè)化蛋白A親和層析介質中使用的基本為改造的蛋白A配基,改善了天然蛋白A的缺點,提高了耐堿能力和洗脫 pH。月旭科技推出的耐堿抗體親和介質-耐堿Protein A Solid/耐堿Protein A 4FF, 由大腸桿菌表達,經層析純化獲得,純化過程不適用抗體柱親和層析,避免了產品中摻入無關IgG的可能,改配基pH耐受0.5M NaOH和0.5M HCl處理,不降解,抗體結合能力不變。該介質適合從大批培養(yǎng)液捕獲單克隆抗體或Fc融合蛋白,也適合與從腹水或者血漿中捕獲多克隆抗體。
技術參數(shù)
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應用實例
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