免疫球蛋白的 金屬螯合色譜分離
更新時間:2021-10-14 點擊次數(shù):1351
● 免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)具有抗體活性,是脊椎動物在對抗原刺激的免疫應(yīng)答中,由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的,能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合的或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的一類球蛋白。它普遍存在于哺乳動物的血液、組織液、淋巴液和體外分泌液中,是主要的液體免疫物質(zhì)。1890年,德國學(xué)者Behring和日本學(xué)者北里shou次發(fā)現(xiàn)免疫球蛋白。隨后人們用電泳技術(shù)證明了血液中抗體的活性存在于γ區(qū)、β2區(qū)、β區(qū)和α區(qū)。為了避免名稱上的混亂,1964年WHO命名委員會統(tǒng)一將抗體和一些化學(xué)結(jié)構(gòu)、抗原性與其有關(guān)的蛋白統(tǒng)稱為免疫球蛋白。免疫球蛋白廣泛應(yīng)用于開發(fā)新型功能性食品添加劑,仔畜飼料以及生物新藥和醫(yī)藥生化診斷、檢測試劑等,已經(jīng)成為研究和商業(yè)等部門重要的物質(zhì)。所以免疫球蛋白的純化也備受關(guān)注。
● 由于免疫球蛋白對金屬螯合色譜的親和力最大,因此可采用增加上樣量使其突破飽和點再用強(qiáng)洗脫液洗下吸附的免疫球蛋白。據(jù)報道,此法得到的免疫球蛋白的純度可達(dá)95%,活力幾乎沒有損失。
● 金屬螯合色譜是一種利用金屬離子與蛋白質(zhì)中的某些氨基酸,如組氨酸等*的親和力進(jìn)行分離純化的新型色譜分離技術(shù),它具有條件溫和,分離的蛋白質(zhì)活性回收率較高。同時操作較為簡單,具有較高的處理能力,使用壽命也較長,適宜于生物活性蛋白的分離純化。
● 月旭推出的Chelating Tanrose 6FF金屬螯合親和介質(zhì),由亞氨基二乙酸(IDA)偶聯(lián)到瓊脂糖而成,相當(dāng)于未螯合Ni離子的Ni Tanrose 6FF(IDA)。Chelating Tanrose 6FF介質(zhì)的配基可提供3個配位位點同金屬離子螯合,同時提供三個離子鍵結(jié)合部位高親和的純化目的蛋白,親和力要強(qiáng)。可廣泛應(yīng)用于分離提純蛋白質(zhì)和多肽。其原理是利用蛋白質(zhì)的組氨酸、半胱氨酸和色氨酸的側(cè)鏈與多種過渡金屬離子如Cu2+,Zn2+,Co2+,F(xiàn)e3+的相互作用,從而達(dá)到分離純化的目的。