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蛋白純化填料解析——葡聚糖與瓊脂糖基質(zhì)
更新時間:2021-11-11 點擊次數(shù):4798
今天要給大家介紹一下月旭科技蛋白純化填料中使用的兩種基質(zhì),分別為葡聚糖基質(zhì)與瓊脂糖基質(zhì)。
交聯(lián)葡聚糖凝膠是由葡聚糖(dextran,又稱右旋糖酐)通過環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)形成的球形凝膠。交聯(lián)劑環(huán)氧氯丙烷的兩個基團分別與兩個葡聚糖殘基中的游離羥基發(fā)生反應,使葡聚糖分子內(nèi)或分子之間發(fā)生交聯(lián),形成網(wǎng)狀結構的微球。葡聚糖是水溶性的,交聯(lián)后才得到非水溶性和具有一定耐壓強度的交聯(lián)葡聚糖凝膠,可直接用于凝膠色譜。合成交聯(lián)葡聚糖時糖濃度和交聯(lián)劑用量和反應條件決定了凝膠的交聯(lián)度和網(wǎng)孔大小,也決定了該填料的耐壓強度和排阻極限。
孔徑小的葡聚糖凝膠(G-10、G-15、G-25、G-50)主要用于脫鹽、肽與其他小分子的分離,通常分子量在100萬以上的生物大分子無法使用葡聚糖凝膠,要用瓊脂糖凝膠,凝膠型號G后面得數(shù)字粗略表示了10g該類型凝膠得吸水值(ml)。
月旭Tandex G系列
葡聚糖凝膠產(chǎn)品性能
瓊脂糖是從海洋紅藻中提取的天然高分子化合物,它是由β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖兩種單糖交替連接而成。其中β-D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖之間通過β(1→4)糖苷鍵連接,而3,6-脫水-L-半乳糖和β-D-半乳糖之間通過α(1→3)糖苷鍵連接。瓊脂糖在常溫下是固體,在水中加熱到45℃以上時溶解,在無交聯(lián)劑存在時冷卻能形成凝膠。當熱的瓊脂糖溶液(糖濃度2%~16%)進行冷卻時,鏈狀分子之間會先形成雙螺旋,并進一步自發(fā)聚集形成束狀結構,再進一步形成多孔的三維網(wǎng)狀結構的瓊脂糖凝膠。
糖溶液的濃度不同,凝膠的平均孔徑也不同,糖濃度大,凝膠的平均孔徑小,從而用于色譜時排阻極限也小。高流速的瓊脂糖凝膠耐壓可達0.3~0.4MPa,基本滿足蛋白質(zhì)大規(guī)模分離的需要。