根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求配制相應(yīng)的流動(dòng)相接入儀器的各個(gè)通路,并配制泵頭和自動(dòng)進(jìn)樣器的清洗溶液(10% IPA)。
打開泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱和檢測(cè)器模塊的電源。
打開電腦,啟動(dòng)工作站,查看各模塊的連接狀態(tài),斷開檢查器流路,用低流速啟動(dòng)系統(tǒng),觀察系統(tǒng)壓力,排盡假期前保存的純MeOH溶液,壓力穩(wěn)定,接入檢查器流路。
開排氣閥,單個(gè)通路排氣泡,排完后記得旋緊。
設(shè)置流動(dòng)相初始比例開始平衡;若流動(dòng)相含有緩沖鹽,請(qǐng)先用10%的有機(jī)相水溶液進(jìn)行過(guò)渡,再換成儀器方法初始比例的流動(dòng)相進(jìn)行平衡。
執(zhí)行自動(dòng)進(jìn)樣器清洗命令,并將進(jìn)樣閥切換至Inject的狀態(tài)進(jìn)行平衡。
設(shè)置方法所需的柱溫箱溫度。
若使用VWD/DAD檢測(cè)器,待泵開啟約5min后再打開氘燈或鎢燈,并設(shè)置檢測(cè)波長(zhǎng)等。
若使用FLD檢測(cè)器,需設(shè)置池溫、激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng)、采集頻率等。
若使用RI檢測(cè)器:先打開沖洗閥(purge=on)沖洗參比池約20min,再關(guān)閉沖洗閥(purge=off),并設(shè)置池溫和極性。
若使用ELSD-5450檢測(cè)器,首先開啟氮?dú)鈮毫Φ?.5bar,確保能持續(xù)供氣,設(shè)置到高溫,如80℃,沖洗25min左右。監(jiān)測(cè)基線,待系統(tǒng)流路充分平衡后,基線正常穩(wěn)定,可以開始進(jìn)樣分析。
開機(jī)后壓力在一段時(shí)間逐漸變化(升高或降低),這往往是流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。如果儀器沒有問題,只要多平衡一會(huì)就會(huì)穩(wěn)定。若使用的是梯度程序,由于流動(dòng)相的比例正處在變化中,壓力也會(huì)跟隨變化。
泵無(wú)壓力,不過(guò)液,通常會(huì)出現(xiàn)在長(zhǎng)假之后,我們排查一下,如果管路里有大段的空氣,重新Purge之后還是不能正常過(guò)液,我們可以使用注射器吸出液體重新連接管路,如單向閥內(nèi)寶石球粘滯問題,可更換單向閥閥芯或用甲醇超聲后裝回。
液相色譜儀開機(jī)后如果壓力瞬間變化>3MPa,通常以下四種情況,可依次排查解決:
是否有氣泡;是否有漏液;單向閥不良;或者泵工作相位不正確,可逐個(gè)排除。