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親和層析填料種類眾多,達四五十種,而新的親和填料不斷的被開發(fā)出來。親和填料純化原理主要是根據(jù)蛋白與配基之間的特異性結合的原理,將能與蛋白特異性結合的配基交聯(lián)到填料上,就可以純化特定的蛋白。親和填料操作簡單,純化效果好,基本一步就可以將蛋白純化成很好的純度。現(xiàn)實分離純化過程中,越來越多的蛋白的分離都在使用或者尋找親和的方法。親和填料種類眾多,以下簡單介紹幾種常用的填料類型。
以蛋白為配基系列的親和填料
(1)Protein A 和耐堿 Protein A 親和填料
Protein A 是來自于金黃色Staphylococcus細胞壁的一種蛋白 ,可以特異性結合哺乳動物 IgG 的 Fc片段。因此,將 Protein A 蛋白交聯(lián)到瓊脂糖球上,就可以純化哺乳動物抗體。本公司自主構建生產(chǎn)與天然 Protein A結構類似的重組 Protein A 蛋白,以及經(jīng)過人工改造的可以耐堿的 Protein A 蛋白。根據(jù)配基 Protein A蛋白耐堿與否 , 可以將填料分為 rProtein A Welchrom 和耐堿 rProtein A Welchrom ,根據(jù)基球類型可分為 rProtein A Welchrom 4B、rProtein A Welchrom 4FF、rProtein A Welchrom Cap 和耐堿 rProtein A Welchrom 4B、耐堿 rProtein A Welchrom 4FF、 耐堿 rProtein A Welchrom Cap 等幾種填料。
(2)Protein G 親和填料
Protein G 是鏈球菌表面的一種細胞壁蛋白 ,可以特異性結合哺乳動物IgG 的Fc 片段 ,其親和范圍比 Protein A 廣,尤其對抗體亞型有很好的純化效果。被廣泛用于腹水、細胞培養(yǎng)液以及 Fc 融合蛋白的純化。
本公司主要的 Protein G 填料類型有 rProtein G Welchrom 4B和 rProtein G Welchrom 4FF 兩種。
(3)Protein L 親和填料
Protein L 是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來的能和免疫球蛋白特異性結合的蛋白質(zhì),與 A、 G 不同的是, Protein L 專一性結合抗體輕鏈部分。蛋白 L 結合更寬范圍的抗體類大于蛋白 A 或 G 蛋白 L 結合所有抗體類,包括 IgG,IgM,IgA 的,IgE 和 IgD 的代表。盡管有很寬的結合范圍內(nèi),蛋白質(zhì) L 不是一個通用的抗體結合蛋白。 L 蛋白結合僅限于那些含有κ輕鏈的抗體,在人類和小鼠抗體,抗體分子除了包含κ輕鏈,其余有ι輕鏈。例如,它結合人 VκI,VκIII 和 VκIV 亞型但不結合 VκII 亞型。
本公司主要的產(chǎn)品類型有 rProtein L Welchrom 4B 和 rProtein L Welchrom 4FF。