高壓液相色譜柱主要由不銹鋼制成
現(xiàn)在流行兩種主要的高壓液相色譜柱的式樣,關鍵部件卡套有些不同。
一種式樣是螺母、卡套全套在柱管上,分配器和燒結(jié)過濾板按順序放在尾部接頭內(nèi)。擰緊螺母和尾部接頭,卡套一次成型緊緊咬住柱管外壁,起到很好的密封作用。分配器使得高壓流動相不集中在一點沖擊柱床,又能把由流動相帶來的樣品分散到柱頭上均勻分離,形成對稱的色譜峰。燒結(jié)過濾板的孔徑<5微米,除了能緩和高壓流動相對固定相的沖擊,也擋住了污染物進入色譜柱柱頭。
高壓液相色譜柱怎樣過濾流動相和樣品:
流動相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成,原則上,所有經(jīng)過高壓液相色譜柱的流動相均應過濾,但在實際操作上應視具體情況而有所區(qū)別:當有機溶劑用色譜純級,水用石英亞沸水或其它超純水時,在能確保水和有機溶劑的質(zhì)量且沒有受到污染時,過濾并無更多實際意義。
當流動相中含有緩沖鹽時,則過濾是必要的,如前所述,當緩沖溶液放置一段時間(視環(huán)境溫度不同而異,夏季一般不超過48 h,冬季一般不超過一周)后,在使用前還應重新過濾。
所配制的樣品試液在注入流路系統(tǒng)前均要經(jīng)0.45μm(0.22μm則更好)孔徑濾膜過濾。要注意區(qū)分水系和油系,二者不可混用,以防止濾膜溶解而造成污染。
裝流動相的容器和色譜系統(tǒng)中的在線濾器要定期清洗和更換,以避免濾器因過載而起不到過濾作用。