固相萃取過程解讀
更新時(shí)間:2021-12-10 點(diǎn)擊次數(shù):2311
固相萃取(Solid-Phase Extraction,SPE)是一種樣品預(yù)處理技術(shù),由液固萃取和柱液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來,主要用于樣品的分離、純化和濃縮。與傳統(tǒng)的液液萃取法相比,可以提高分析物的回收率,更有效的將分析物與干擾組分分離,減少樣品預(yù)處理過程,操作簡單、省時(shí)、省力。液液萃取主要還是做一些弱極性或非極性的目標(biāo)物,對(duì)那些極性過強(qiáng)或者離子型目標(biāo)物并不適用,而且沒有除雜過程,處理后的樣本會(huì)含有非極性的雜質(zhì),不但會(huì)污染色譜柱和儀器,也會(huì)造成一定的基質(zhì)效應(yīng)。固相萃取理論上非極性、極性、離子型目標(biāo)物都可以適用,這也是近年來固相萃取技術(shù)越來越流行的原因。
SPE固相萃取按照保留物質(zhì)分為類:一類為保留目標(biāo)化合物;另一類為保留雜質(zhì)(類似QuEChERS的前處理操作)。SPE固相萃取按照填料類型分為三類:非極性保留型;極性保留型;離子交換型。下圖為SPE處理過程。
SPE一般是用一定體積的有機(jī)試劑和一定體積的水溶性試劑進(jìn)行分步過柱來實(shí)現(xiàn)活化過程?;罨腥缦聝蓚€(gè)目的:
通過有機(jī)試劑和水溶性試劑過柱來去除小柱中自帶的一些雜質(zhì),避免系統(tǒng)污染和對(duì)上樣效果的影響。
使填料表面的官能團(tuán)更有序的舒展開,為后面的上樣液增大接觸面積,起到更好保留的作用。
活化之前高聚物的結(jié)構(gòu)排布是不規(guī)則的,很多結(jié)構(gòu)都是像“毛線團(tuán)"一樣緊緊抱在一起的。這就會(huì)造成很多官能團(tuán)被包裹在“線團(tuán)"里面,起不到很好的與目標(biāo)物接觸并起到保留作用。所以活化后這些結(jié)構(gòu)排布就會(huì)變得非常有秩序,增大了與目標(biāo)物的接觸面積,也就會(huì)很好的保留住目標(biāo)物了。
經(jīng)過活化后,我們就可以把經(jīng)過預(yù)處理的樣本進(jìn)行上樣操作了。上樣后目標(biāo)物就會(huì)牢牢的被保留在SPE填料上,當(dāng)然也會(huì)有一些性質(zhì)和目標(biāo)物類似的雜質(zhì)被保留在SPE上。其余的雜質(zhì)就會(huì)直接隨著上樣液流出來。
淋洗的目的就顧名思義了,就是把雜質(zhì)淋洗下來,避免對(duì)色譜柱和儀器的污染,也會(huì)減少雜質(zhì)對(duì)目標(biāo)物檢測(cè)的干擾,這個(gè)減少干擾也就是所謂的減少基質(zhì)效應(yīng)。
洗脫就是用試劑來破壞目標(biāo)物與填料間的作用力,從而將目標(biāo)物從填料上分離并收集起來。
此過程為可選步驟,通常有兩種情況會(huì)需要氮吹復(fù)溶操作。一是洗脫液與初始流動(dòng)相差別較大,如果直接進(jìn)樣的話可能會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的溶劑效應(yīng),影響峰型,因此需要氮吹揮干后用初始流動(dòng)相復(fù)溶后進(jìn)樣分析。二是儀器檢測(cè)的靈敏度達(dá)不到實(shí)際樣品分析要求時(shí),可氮吹揮干后用小體積復(fù)溶液復(fù)溶,增大目標(biāo)物濃度后再進(jìn)樣分析。